成熟组织高效转化
利用Cre/loxP重组系统结合IPT正筛选,从脐橙成熟茎段高效获得无选择标记基因的转基因植株,缩短转化周期且不依赖种子。
何永睿 · Xu, Lanzhen · 彭爱红 · Lei, Tiangang · Li, Qiang · 姚利晓 · Jiang, Guojin · 陈善春 · 李正国 · 邹修平
Horticultural Plant Journal 2023
用成熟组织作外植体,摆脱对种子的依赖,从转化到获得植株的时间比用实生苗上胚轴明显缩短。
Cre/loxP重组系统在获得的转基因植株中将Cre和IPT基因全部删除,删除效率100%,最终植株不含选择标记基因。
通过比较五种再生芽恢复方法,确定使用长度大于1 cm且展叶的木质化再生芽进行离体微嫁接,经一个月连续培养木质化后效果最佳,使成熟组织转化后的植株恢复成为可能。