负调控因子筛选系统

首个通过抗性报告系统配合CRISPR敲除库高效筛选I型干扰素通路负调控因子的平台，鉴定出PCGF3/5等新因子。

Zhaojun, Pang · 韩扬 · 李博 · Zhao, Zhenxiang · 朱紫祥 · 穆昕

Advanced Biology 2025

参数信息

鉴定到的负调控因子候选基因

PCGF3/5, UCK2, ITPKA

技术优势

无需构建复杂模型

通过抗性报告基因设计，仅当干扰素通路激活时细胞才能存活，因此筛选无需预先构建动物模型或复杂细胞系，可直接在常规细胞中实施。

与CRISPR库无缝衔接

筛选系统与CRISPR敲除库直接配合使用，通过敲除负调控因子导致干扰素通路激活，使细胞在筛选条件下存活，从而高效富集候选基因。

一次筛选多位点发现

利用全基因组CRISPR敲除库，单次筛选即可并行鉴定多个负调控因子候选基因，如PCGF3/5、UCK2、ITPKA等，显著提高发现效率。

应用场景

• 自身免疫病机制研究：利用筛选系统发现新的负调控因子，解释干扰素通路异常激活导致自身免疫病的分子机制。
• 抗病毒药物靶点筛选：筛选出的负调控因子可作为抗病毒药物靶点，通过抑制其功能增强干扰素抗病毒反应。
• CRISPR功能筛选：该筛选系统与CRISPR敲除库结合，为CRISPR功能筛选提供特定通路激活的表型读出。
• 干扰素通路调控研究：通过筛选发现的负调控因子，揭示干扰素通路新的调控节点和网络。