EG响应生物传感器

高动态范围

通过FACS辅助的转录因子工程定制,动态范围和操作范围显著增强,用于筛选PET降解酶。

李敏 · 陈振娅 · Wu, Tong · 祁庆生 · 霍毅欣

Advanced Science 2025

参数信息

k_cat/K_m增加倍数
1.52 倍
K_m降低倍数
1.18 倍
V_max增加倍数
1.29 倍
TPA产量增加倍数
1.59 倍
BHET解聚时间
10 h
PCA产量
997.16 mg L^-1
GA产量
411.69 mg L^-1

技术优势

动态范围显著增强

通过FACS辅助的转录因子工程,定制了EG响应生物传感器,使其动态范围和操作范围显著增强,从而能够区分不同活性的酶变体。

解决MHETase可溶表达

SUMO-MHETase-FastPETase嵌合体实现了MHETase在大肠杆菌中的功能性可溶表达,并减轻了MHET中间产物的抑制作用,使整个降解途径更高效。

催化效率提升

SMM3F突变体对MHET的K_m降低1.18倍,V_max增加1.29倍,k_cat/K_m增加1.52倍,表明亲和力和催化活性更强。

完全解聚BHET

SMM3F粗提物在37°C下10小时内将5 g L^-1 BHET完全解聚为TPA,且无需纯化,简化了流程。

应用场景