高活性重组表达
获得鲤鱼脂蛋白脂肪酶同源基因的重组蛋白,并系统测定其酶学特性,为鱼类脂肪代谢调控和低脂养殖提供靶点。
Yujing, Wang · 冯文荣 · Xu, Yuxin · Li, Jianlin · 苏胜彦 · Yu, Juhua · 唐永凯
Journal of Fisheries of China 2023
Skp-CcLPLA1a重组蛋白的酶活性为(22.66±0.46) U/g,在所有重组蛋白中仅次于SlyD-CcLPLA1a,表明分子伴侣标签有助于保持酶的高活性。
利用大肠杆菌原核表达系统,成功获得带有Skp或SlyD分子伴侣标签的六种重组蛋白,实现了鲤鱼脂蛋白脂肪酶的高效可溶性表达。
确定了酶的最适反应pH为8.0,获得最大活性的NaCl浓度为0.6 mol/L,为酶制剂的工业应用提供了重要的工艺参数。