Foldback-crRNA增强Cas13a系统

超短sncRNA直接检测

该FCECas13a系统采用3'端foldback crRNA,可绕过Cas13a对长crRNA-靶标双链的要求,直接检测短于20 nt的sncRNA。

陈勇 · Zhang, Yibin · 罗素媛 · Liu, Conghui · 张黔玲 · 刘翼振 · 张学记

Analytical Chemistry 2023

参数信息

检测限

15 fM

技术优势

能检测超短RNA

通过foldback crRNA与17 nt的miRNA720杂交形成双链，激活Cas13a，突破了传统Cas13a对长crRNA-靶标双链的要求。

检测限低至15 fM

对miRNA720的检测限达到15 fM，20分钟内完成，满足高灵敏度快速检测需求。

无需基因组DNA参考

Cas13a的检测不受基因组DNA干扰，简化了样品处理流程，提高检测特异性。

应用场景

• 分子诊断：直接检测超短sncRNA，无需扩增即可达到15 fM灵敏度，适合临床样本快速筛查。
• 疾病预后：miRNA720等tRNA衍生小RNA作为疾病预后标志物，该系统可快速定量其水平。
• CRISPR检测：扩展了CRISPR/Cas13a诊断平台的应用范围，使其能够检测短于20 nt的RNA靶标。
• RNA检测：提供一种无需逆转录或扩增的超短RNA直接检测方法，简化操作流程。