高保真Cas12a变体

脱靶显著降低

通过多点突变改造，在保持野生型相当活性的同时，显著降低了PAM远端区域的脱靶切割。

Chen, Peng · 周进 · 刘欢 · Zhou, Erchi · Wu, Yankang · 王宏建 · Sun, Zaiqiao · Paek, Chonil · 雷军 · 陈永顺 · 张兴华 · 尹蕾

PLoS Biology 2024

参数信息

突变位点

S186A/R301A/T315A/Q1014A/K414A

技术优势

脱靶大幅下降

在人类细胞中，HyperFi-As 对 PAM 远端区域错配的耐受性显著低于野生型，从而避免了非特异性切割。

活性不打折

引入多个点突变后，HyperFi-As 在人类细胞中的靶向编辑活性仍与野生型相当，无需在效率和特异性之间取舍。

应用场景

• 基因治疗：减少脱靶突变，让治疗性基因编辑更安全。
• 基础基因编辑研究：研究Cas12a特异性机制时，用HyperFi-As作为高保真参考工具。
• 转基因模型构建：提高转基因动物模型中靶基因敲入/敲除的精确度。