高效低成本合成gRNA文库
一种基于可逆终止子的可控模板依赖延伸方法，能够以组织特异性方式合成超大容量gRNA文库，用于哺乳动物基因组功能元件的饱和筛选。
Pan, Chen · 李冉 · Shui, Liyan · Xiao, Zhengyun · Wang, Yali · Zhu, Jing · Wu, Chao · 张龙 · Jia, Junling · 郑敏
Nucleic Acids Research 2023
通过可控模板依赖延伸法可以合成超大容量gRNA文库，使对特定基因组区域的筛选达到饱和覆盖，无需因文库规模不足而遗漏关键元件。
CTDE方法具有高效低成本的特点，且有望实现自动化，使得大规模gRNA文库的构建不再昂贵，普通实验室也能开展饱和筛选。
利用染色质免疫沉淀获得的DNA为模板，能够以组织特异性方式合成gRNA文库，使筛选结果更贴近特定细胞类型的调控图谱。