耐热α-淀粉酶菌株

胞外酶活超3745 U/mL

通过CBM68引导的非经典分泌途径与多基因改造,在枯草芽孢杆菌中实现耐热α-淀粉酶的稳定高分泌表达。

Yifan, Yang · Fu, Xiaoping · Zhao, Xingya · 徐建勇 · 刘逸寒 · 郑宏臣 · Wenqin, Bai · 宋惠

Fermentation 2023

参数信息

CBM68引导BLA702胞外酶活
1248 U/mL
CBM68引导BLA702相对原始信号肽的倍数
12.6
CBM68引导BLA702相对LipA信号肽的倍数
7.2
基因敲除菌株0127胞外淀粉酶活提高倍数
2.5
工程菌株0127(AmyE::BLA702-NprB::CBM68-BLA702-PrsA)最高胞外酶活
3745.7 U/mL

技术优势

分泌效率提高12.6倍

用CBM68引导BLA702,通过非经典分泌途径绕开传统信号肽限制,胞外酶活比原始信号肽提高12.6倍。

敲除转运蛋白再增2.5倍

敲除特定大分子转运蛋白(菌株0127)后,CBM68-BLA702胞外酶活进一步提高2.5倍,说明该转运蛋白原本抑制分泌。

基因组整合实现稳定传代

将BLA702和CBM68-BLA702整合到染色体AmyE和NprB位点,并过表达分子伴侣PrsA减少包涵体,所得菌株传代稳定性优于质粒表达菌株。

应用场景