两步杂交纯化法

miRNA修饰定量

专用纯化策略，比现有技术更可靠地揭示内源miRNA修饰。

徐华 · Huang, Aixue · Qu, Minmin · He, Weiwei · Chen, Jia · Xu, Bin · 郭磊 · 谢剑炜

Analytical Chemistry 2024

参数信息

修饰丰度均低于

1 %

技术优势

定量更可信

LC-MS/MS能直接识别修饰核苷，结合两步杂交纯化排除非目标RNA，结果比现有技术更可靠。

特异性高

液固两步杂交纯化增强了对目标miRNA的纯化特异性，减少其他RNA污染。

灵敏度够用

检测下限从阿托摩尔到低飞摩尔，足以分析细胞中低丰度的内源miRNA修饰。

应用场景

• 核酸修饰分析：直接定量miRNA上的m6A、m7G、m5C修饰，精确刻画修饰谱。
• 高灵敏定量检测：检测下限低至阿托摩尔，适合分析低丰度内源修饰。
• 色谱质谱联用：利用LC-MS/MS可定量识别特定修饰核苷，克服传统方法的不确定性。