供体DNA锚定增韧
一种将Cas9与病毒复制蛋白Rep融合的分子桥，在体内锚定供体DNA，从而提高同源定向修复介导的基因插入效率。
阴帅 · Chen, Yache · Yuan-Yuan, Yang · Zhang, Jianwei · 熊立仲 · 谢卡斌
Plant Biotechnology Journal 2025
Cas9-Rep融合蛋白在体内将供体DNA富集到靶位点，相比单独使用Cas9，三个水稻基因的敲入频率提升4-7.6倍。
该方法使高达72.2%的稳定水稻转化体在T0代携带框内敲入事件，无需多代筛选。
全基因组测序显示，敲入事件在后代中忠实地遗传，未检测到脱靶编辑或供体DNA片段的随机插入。
染色质免疫沉淀实验表明，Cas9-Rep融合蛋白结合的供体DNA比Cas9多66倍，为高效HDR提供了分子基础。