双RNA导向Cas9核酸酶

靶标激活反式切割

首次发现Cas9在双RNA导向下可被DNA或RNA靶标激活，产生序列偏好性的反式切割活性，为无蛋白标记的核酸检测提供新型酶工具。

Chen, Jiyun · 陈颖 · 林晓凤 · 陈竑 · Xiang, Wenwen · 刘亮

Nature Biotechnology 2024

技术优势

多种靶标都能激活

单链 DNA、双链 DNA 和单链 RNA 都可以激活 Cas9 的反式切割，不用为不同靶标类型更换酶。

序列偏好明确

Cas9 优先切割富含 T 或 C 的单链 DNA 底物，可以据此设计报告探针来提高检测信噪比。

无需蛋白标记

检测平台依赖 Cas9 的反式切割活性，不需要给抗体或蛋白偶联标记物，简化了操作流程。

应用场景

• 核酸检测：用 Cas9 的反式切割活性直接读出靶标核酸，适合现场快检。
• 生物传感器：把 Cas9 做成传感器识别元件，靶标一结合就触发信号。
• 基因编辑：利用 Cas9 对靶标的特异性结合，开发新的基因编辑检测工具。
• 分子诊断：结合等温扩增实现高灵敏分子诊断，替代复杂仪器。