艰难梭菌无细胞蛋白表达系统

有氧半小时出蛋白

无需厌氧培养，直接用线性DNA模板快速合成蛋白，让艰难梭菌基因表达研究不再依赖活菌操作。

Zeng, Ji · 王浩 · 刘铮 · 张小康 · 田国宝 · Dong, Min

Applied and Environmental Microbiology 2024

技术优势

有氧就能做

系统在常氧条件下即可进行转录和翻译，无需厌氧培养箱，显著降低操作门槛。

半小时出结果

从加入DNA到获得蛋白仅需约30分钟，大幅缩短实验周期。

线性DNA更好用

使用线性DNA模板比环状质粒获得更高蛋白产量，省去质粒构建步骤。

体内外表达一致

合成启动子在体内外表达水平相关性良好，可用于启动子快速筛选。

应用场景

• 艰难梭菌基因调控研究：在无细胞体系中快速表征转录翻译调控元件，无需活菌操作。
• 病原菌毒力因子筛选：直接表达毒素基因比较不同菌株毒力差异，如超毒力株R20291。
• 无细胞合成生物学工具：作为遗传元件原型测试平台，体外验证启动子强度与体内一致性。
• 厌氧菌蛋白生产：在有氧条件下合成厌氧菌蛋白，避免厌氧培养的复杂操作。