52分钟裸眼判读,限25拷贝
把逆转录等温扩增和Cas12a切割装进一个反应管,直接用甘蔗粗提液上样,无需核酸纯化,检测灵敏度与qPCR相当,结果可用肉眼判断。
王艇 · Zhao, Hong · 郭晋隆 · 阙友雄 · 许莉萍
Microbiology spectrum 2024
用甘蔗叶片粗提液直接作为反应模板,无需离心柱或有机溶剂纯化,简化了操作流程。
逆转录等温扩增和CRISPR-Cas12a切割在同一反应管中进行,减少开盖操作,降低了气溶胶污染风险。
最低检出限为25拷贝,与金标准qPCR相当,但无需昂贵的热循环仪和专业操作。
阳性样品的粗提液在4°C放置1周后仍能稳定检出,便于田间采集后集中检测。