双歧杆菌微型Cas9基因编辑工具

适配益生菌株基因组编辑

首个来源于长双歧杆菌的II-C型CRISPR系统，识别新型PAM，支持在益生菌大肠杆菌Nissle 1917中进行多重基因组工程。

Qibing, Liu · Yan, Huang · Ran, Zhou · Honghao, Ding · Qingqing, Nie · Xiaoyuan, Gong · Ting, Zuo · 王帅 · Yunxiang, Liang · 李迎君

ACS Synthetic Biology 2026

参数信息

PAM识别序列

5′-NNRMAT-3′

GABA产量提升倍数

2.4

技术优势

编辑益生菌不再受限

通过解析双歧杆菌内源II-C型CRISPR系统，绕过了益生菌中常见的细胞屏障，直接实现对益生菌菌株的遗传操作。

新型PAM拓展靶标范围

BLCas9识别5′-NNRMAT-3′ PAM，与常见的NGG等PAM不同，能够靶向之前无法编辑的基因组位点。

代谢工程产出翻倍

通过靶向代谢工程，胞外GABA产量提高至原始菌株的2.4倍，为利用益生菌调节宿主生理功能提供了直接证据。

应用场景

• 合成生物学工具：提供新型PAM识别特性，可与其他Cas9系统互补拼接多基因回路。
• 益生菌工程：直接转化质粒即可对益生菌株进行定向改造，加速功能菌株开发。
• 基因组编辑：在细菌中实现多重基因编辑，效率高且无需复杂筛选流程。
• 活体生物治疗：支持对益生菌底盘进行代谢工程，按需表达治疗性分子如GABA。