Cas9-Vir蛋白复合体

HDR效率提升52倍

将Cas9与农杆菌毒力蛋白融合，通过同源定向修复路径实现植物基因组精准编辑，效率远超单独使用Cas9。

Tang, Ye · 张振南 · 杨志远 · Wu, Jiahe

Journal of Experimental Botany 2023

参数信息

GFPm基因HDR频率提升倍数

52 ×

OsPDS基因HDR效率提升倍数

24 ×

OsALS基因HDR效率提升倍数

32 ×

OsNRT1.1B基因HDR效率提升倍数

16 ×

技术优势

HDR效率提升52倍

通过融合Cas9与VirD2并添加VirD1、VirE2，CvDT系统将GFPm报告基因的HDR频率较Cas9T提高52倍。

内源基因也能大幅提升

CvDTL系统将水稻内源基因OsPDS、OsALS和OsNRT1.1B的HDR效率分别提高24、32和16倍，表明该策略适用于真实作物基因。

供体连接子进一步优化

在CvDT基础上加入供体连接子（CvDTL），可进一步提高HDR介导的基因组编辑效率。

应用场景

• 植物基因编辑：提供高效精准的HDR工具，用于植物基因敲入和替换。
• 作物精准改良：加速水稻等作物的定点改良，如抗病、抗逆性状。
• 植物合成生物学：允许精确修饰内源基因，构建定制化代谢通路。
• 植物生物技术：提高编辑精度，减少脱靶，推动更安全的作物生物技术。