碱基编辑系统

一步失活多基因

在受精卵中同时敲除Dnmts/Tets，快速揭示胚胎发育中DNA甲基化的功能，适用于体内基因功能解码。

Qing, Li · Lu, Jiansen · Wang, Chao · Meng, Yan · Lai-Feng, Li · Gao, Yun · Xu, Beiying · 张瑶 · Cui, Guizhong · 徐亮 · Sun, Yidi · 曾嵘 · 李亦学 · 景乃禾 · 徐国良 · 吴立刚 · 汤富酬 · Li, Jinsong

Nature Communications 2023

参数信息

突变胚胎生成步数

1 步

原肠胚形成失败时间点

E7.5

原条伸长恢复所需突变等位基因数

1 个

技术优势

一步生成多基因敲除胚胎

在受精卵中直接注射IMGZ碱基编辑器，可同时引入Dnmts和/或Tets的终止密码子突变，无需多轮杂交，将获得多基因敲除胚胎的时间从数月缩短到一次操作。

高效引入终止密码子

通过筛选碱基编辑器，IMGZ能够在靶位点高效引入提前终止密码子，确保多个基因同时被可靠失活，为系统性功能研究奠定基础。

揭示甲基化调控机制

利用Dnmt缺失胚胎，发现尽管DNA甲基化缺失，原肠胚相关通路却下调，进一步通过引入单个突变等位基因的六种miRNA和父本IG-DMR部分恢复原条伸长，证明启动子甲基化通过抑制miRNA表达调控原肠胚形成。

应用场景

• 基因功能解码：在受精卵中一步失活多个基因，快速建立基因功能与表型关联。
• 胚胎发育研究：直接获得Dnmt/Tet敲除胚胎，解析甲基化在早期发育中的关键作用。
• 多重基因敲除模型：绕过传统多轮杂交，在合子阶段同时敲除多个基因，加速模型构建。